Наследственный синдром рака молочной железы и яичников — это наследственно состояние, при котором уровень рака молочной железы и рака яичников выше чем в среднем по популяции. Причиной этого синдрома являются мутации генов BRCA1/2. Частота этих мутаций одинакова у мужчин и женщин. Исследований связи мутации генов BRCA1/2 с показателями мужской фертильности к настоящему времени не проводилось. Цель настоящего исследования: провести оценку репродуктивного здоровья мужчин в семьях с наследственным синдромом рака молочной железы и яичников. В исследование были включены родственники первой степени родства 172 пациенток с верифицированным раком яичников I–II стадии. Идентификация мутаций в генах ВRCA 1/2 осуществлялась методом молекулярно-генетического анализа с помощью набора комплекс «Онкогенетика BRCA» (ООО НПФ «Литех» Москва Россия). Показано, что распределение мутаций BRCA1/2 примерно соответствует аутосомно доминантному наследованию. Среди сыновей и братьев носительниц мутаций BRCA1/2 выявлено 97 носителей и 115 не носителей. Среди мужчин-родственников носительниц мутаций BRCA1/2 преобладают мутации BRCA1, которые составляют более 78% всех выявленных мутаций, причем мутация 185delAG составляет 35,05% от всех зарегистрированных мутаций. Определение уровня половых гормонов, показало, что носители мутаций 185delAG и 6174deIT имеют высокий уровень тестостерона. У носителей мутаций 5382insC и Cys61Gly низкий уровень тестостерона. При мутациях 5382insC, Cys61Gly и 185delAG низкий уровень лютеинизирующего гормона. У носителей мутации 185delAG низкий уровень лютеинизирующего гормона высоким уровнем тестостерона, а у носителей мутаций 5382insC и Cys61Gly низкий уровень лютеинизирующего гормона сопровождается низким уровнем тестостерона. У мужчин носителей мутаций BRCA1/2 отмечаются изменения сперматогенеза вплоть до азооспермии — при мутациях 5382insC, и 6174deIT наблюдается высокий уровень агглютинации сперматозоидов. Полученные данные позволяют расширить представления о генетической регуляции сперматогенеза.
1. Введение
Картирование генов в хромосоме 17q21, в 1990 году позволило с помощью анализа сцепления с использованием маркеров генетического полиморфизма у 23 146 человек, из семей, связанных с раком молочной железы, определить
[1]
Ген клонировали в 1994 году с публикацией его полной последовательности
[2][3]
При анализе семей больных раком молочной железы, но не имеющих мутаций гена
[4]
Ген
[5][6][7] Имеются сообщениия[8][9]
2. Методы и принципы исследования
В исследование были включены родственники первой степени родства (сыновья/братья) 172 пациенток с верифицированным раком яичников I–II стадии и клиническими признаками наследственного рака, которые проходили стационарное лечение в Бюджетном учреждении республики Калмыкия «Республиканский онкологический диспансер им. Э.С. Тимошкаевой» и областном онкологическом диспансере г. Астрахани, на протяжении 2019–2023 годов. Для выяснения данных анамнеза проводили индивидуальное анкетирование обследованных. Все пациенты дали письменное согласие на анонимное участие в научном исследовании. Всего дали согласие на обследование 224 человека, но по ряду организационных причин анализ спермограммы был проведен у 174 человек, а уровни тестостерона и лютеинизирующего гормона определены у 201 человека. Медико-генетический анализ проведен у 212 человек. Идентификация мутаций в генах
[7]
Исследования соответствовали установленным этическим стандартам. Все 174 образца исследованной спермы были подвергнуты стандартной спермограмме. Анализ спермы включал следующие параметры; цвет, объем, вязкость, pH, количественные, морфологические и динамические характеристики в соответствии с рекомендацией ВОЗ
[10]
Анализ сывороточного тестостерона проводили с помощью хемилюминесцентного двухэтапного иммуноферментного анализа на иммунохимическом анализаторе фирмы Сименс Аdvia Сentaur xp. Этот метод включал конкурентный иммунохимический анализ с использованием прямой хемилюминесцентной метки. Концентрацию тестостерона вычисляли по калибровочному расчетному графику. Уровень тестостерона выражали в нг/мл. Анализ уровня лютеинизирующего гормона проводили методом иммуноферментного анализа с помощью тест-системы фирмы ХЕМА в соответствии с рекомендациями производителя.
3. Основные результаты
На основании данных полимеразной цепной реакции показано, что в исследованной группе распределение мутаций
Распределение мутаций генов BRCA1/2 среди сыновей и братьев женщин с синдромом HBOC
| носители | здоровые | |
| n | 97 | 115 |
| Средний возраст | 39,7±9,2 | 46,4±7,4 |
| n | 76 | – |
| BRCA1, % | 78,35 | – |
| n | 21 | – |
| BRCA2, % | 21,65 | – |
| Тип мутации BRCA | – | – |
| n | 34 | – |
| 185delAG, % | 35,05 | – |
| n | 19 | – |
| 6174deIT, % | 19,59 | – |
| n | 14 | – |
| 5382insC, % | 14,43 | – |
| n | 12 | – |
| Cys61Gly, % | 9,28 | – |
| n | 12 | – |
| 2080delA, % | 9,28 | – |
| 3819delGTAAA | 3 | – |
| 3819delGTAAA, % | 3,09 | |
| 4153delA | 3 | – |
| 4153delA, % | 3,02 |
Анализ показал, что среди мужчин-родственников носительниц мутаций
[8]
Изменения показателей спермограммы у лиц с мутациями генов BRCA1/2
| Тип мутации | в мл | % активно подвижных | Вязкость, см. | натов, % | % мертвых Сп |
| Контроль (не носители) | 19,72±0,42 | 54,5±0,31 | 1,69±0,21 | 0,77±0,11 | 34,01±0,62 |
| 185delAG | 22,14±0,86 | 44,9±0,77 | 2,81±0,12 | 1,85±0,18 | 48,01±0,2 |
| 6174deIT | 16,92±1,22 | 48,4±0,88 | 1,05±0,55 | 8.43±0,3 | 53,16±0,42 |
| 5382insC | 0,11±0,03 | 0,05±0,01 | 1,04±0,08 | 0,01±0,01 | 89,01±0,74 |
| Cys61Gly | 17,9±0,46 | 12,8±0,54 | 1,60±0,37 | 0,72±0,56 | 64,01±0,62 |
| 2080delA | 2,97±0,14 | 52,75±0,1 | 4,41±0,27 | 0,64±0,7 | 44,01±1,2 |
| 3819delGTAAA | 12,01±0,20 | 77,35±0,14 | 1,53±0,18 | 0,94±0,42 | 32,41±0,12 |
| 4153delA | 11,33±0,57 | 57,25±0,81 | 0,96±0,11 | 0,70±0,85 | 37,10±0,92 |
У субъектов с мутацией гена
Носители мутации гена
Определение уровня тестостерона у представителей семейств с мутациями
Уровень половых гормонов у лиц с мутациями BRCA1/2
| Тип мутации | Общий тестостерон, нмоль/л | р | Лютеинизирующий гормон, | р |
| Контроль (не носители) | ±2,94 | – | 7,42±1,33 | – |
| 185delAG | 21,2±1,60 | 0,000001 | 4,6±0,38 | 0,043282 |
| 6174deIT | 17,86±1,41 | 0,001707 | 8,4±0,57 | 0,499380 |
| 5382insC | 4,55±0,86 | 0,000001 | 1,0 ±0,75 | 0,000001 |
| Cys61Gly | 7,56±1,06 | 0,000033 | 3,7±0,84 | 0,019590 |
| 2080delA | 11,4±2,14 | 0,503122 | 8,3±0,91 | 0,586000 |
| 3819delGTAAA | 17,2±2,15 | 0,056687 | 6,9±0,84 | 0,740728 |
| 4153delA | 24,6±2,10 | 0,000001 | 8,75±1,12 | 0,445891 |
Данные по уровню тестостерона, представленные в Таблице
3[8]
Определение лютеинизирующего гормона у носителей мутаций
±0,977,42±1,33
Комплексная оценка уровня сперматогенеза предполагает определение гормональной «дуги» от гипоталамуса до тестикул. К сожалению, из-за технических сбоев и организационных причин в группе носителей мутаций
4. Обсуждение
Анализируя, полученные результаты, следует отметить, что для мужчин носителей мутации 185delAG характерно состояние нормоспермии, видимо, данный вид мутации не затрагивает основные этапы сперматогенеза и сохраняется нормальная гормональная регуляция этого процесса. Однако у представителей имеющих этот вид мутации отмечено достоверное повышение вязкости семенной плазмы. Этот фактор приводит к повышенному расходу АТФ сперматозоидами и может существенно снизить оплодотворяющий потенциал
[9] Мутация 8,43±0,3 на 100 сперматозоидов в поле зрения. Механизм агглютинации сперматозоидов во многом обусловлен изменением структуры молекул гликопротеинов мембраны сперматозоидов, вероятно, мутация [11]
Носители мутации 5382insC занимают особое место среди мужчин носителей мутаций
[12][13][14]
5. Заключение
Исследование нарушений сперматогенеза в семьях с синдромом HBOC (аутосомно-доминантное наследственное заболевание, при котором риск рака груди и рака яичников выше нормы), показало, что у мужчин носителей мутаций
The additional file for this article can be found as follows:
Further description of analytic pipeline and patient demographic information. DOI: